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时间:2021-04-17 来源:未知 点击:0 次
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液相色谱法(HPLC)是在经典液相色谱法的基础上开发的一种分析方法。由于其快速的样品分析速度,因此称为液相色谱法。目前,它已被广泛应用于生物学,医学,有机化学,食品和饮料以及环境监测等许多领域。
液相色谱分析仪通常由进样器,脱气器,泵,色谱柱,柱温箱,检测器和其他组件组成,如图1所示。原理是:将分析物与流动相一起注入色谱柱,并且由于不同类型的分析物与固定相之间的相互作用力不同,色谱柱中的离子被分离,然后通过检测器获得不同的峰信号。
图1液相色谱分析仪图
液相色谱仪是一种复杂而昂贵的分析系统。如何标准化操作并保持合理的维护以使每个组件达到较长的使用寿命特别重要。在这里,我建议进行微孔过滤,以延长每个组件的使用寿命。
(1)流动相过滤
作为待测物质的载体,流动相将通过脱气机,高压输液泵,进样器,色谱柱,然后进入检测器。流动相的质量将直接影响相关组件的使用寿命。如果未过滤流动相,则内部颗粒将进入系统,从而阻塞或损坏小孔管,色谱柱和高压输液泵。
Anno过滤建议在使用前,先用0.45μm或0.22μmφ47mm滤膜和玻璃滤器对流动相进行过滤。也可以使用孔径相同的φ33mm针头过滤器进行过滤。除了去除细颗粒外,流动相过滤还可以去除小气泡,从而减少脱气机的负担并减少分析过程中的波动。
(2)进样前的过滤处理
液相色谱法检测的样品种类繁多,不同样品的颗粒含量和粒径分布也有很大差异。如果直接进样而未过滤,则将在短时间内导致色谱柱堵塞,从而导致色谱柱压力升高和使用寿命显着降低,如图2所示。
因此,Anno建议使用0.45μm或0.22μm的注射器过滤器在进样前过滤样品。通常,可以根据待处理样品的体积选择适当规格的注射器过滤器进行处理。φ5mm的过滤能力小(
图2色谱柱压力与过滤之间的关系
按照上述建议过滤流动相和待测样品,可以大大保证液相色谱的使用寿命。
过滤注意事项:
(1)请根据化学相容性表选择合适的膜。
(2)请注意滤膜的疏水性。例如,由于疏水性强,建议使用疏水性PTFE过滤有机溶剂,而不过滤水溶液。
(3)由于滤光片或滤膜本身可能会溶解紫外线吸收的干扰物质,并且由于干扰物质溶解而产生的色谱峰太大,会干扰实验数据的分析和判断。因此,强烈建议用户选择制造商,这些制造商已经验证了由滤膜或膜的紫外线吸收引起的干扰物质的溶解,例如ANOW,Millipore,Whatman等。
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